Vergleich von Proteinauftrennungsmethoden

Welche der folgenden Aussagen trifft für die jeweilige Proteinauftrennungsmethode zu?

 

Gelelektrophorese

Gelfiltration

Auftrennung beruht nur auf dem hydrodynamischen Radius des Proteins

Bei gleicher Krafteinwirkung bewegen sich grosse Proteine langsamer durch das Gel

Funktioniert mit nativen und denaturierten Proteinen

Grosse Proteine wandern schneller als kleine Proteine

Ist abhängig von der Ladung des Proteins

richtige Antwort

Struktur von Agarose- Gel

Vom Gel zum Molekül: Ueberlegen Sie:

Welcher Vergrösserungsfaktor liegt zwischen den aufeinanderfolgenden Abbildungen und wie gross ist ein Protein im Vergleich zur jeweiligen Abbildung?


Wanderungsgeschwindigkeit

Von welchen Faktoren hängt die Wanderungsgeschwindigkeit (v) eines Proteins in der Gelelektrophorese bei konstanter Spannung (U) wie im Experiment 4.2 ab?

Parameter

 

Symbol
[Einheiten]

Elektrische Feldstärke

Abstand der Elektroden

Ionenstärke der Pufferlösung

Grösse der Moleküle

Form der Moleküle

Stromstärke

Nettoladung des Proteins

pH-Wert der Pufferlösung

richtige Antwort


Ladung von Aminosäurenseitenketten

Welche Ladung tragen die Seitenketten folgender Aminosäuren bei den angegebenen pH-Werten? Geben Sie für jede Aminosäure die zutreffende Ladung an: + positiv geladen, 0 ungeladen, - negativ geladen.

 

pH 2

pH 7

pH12

Histidin

Alanin

Lysin

Glutaminsäure

Tryptophan

Asparaginsäure

Glutamin

Tyrosin

richtige Antwort

Wie wird der IEP-Wert eines Proteins berechnet? Welche Angaben sind hierzu notwendig?

Zwei Minuten überlegen, dann Ihre Antwort überprüfen!

richtige Antwort


Berechnung von IEP-Werten von Peptiden

Welchen IEP haben folgende Peptide? Lösungsweg siehe Kursheft (Theorieteil "pH-Messung und Titration" oder pH.pdf)

Gly-Ser-Asn-Val-Leu-Gly

Ala-Lys-Phe

 


Proteinladung in Abhängigkeit vom pH-Wert

Welches Vorzeichen hat die Nettoladung der Proteine bei den angegebenen pH Werten?

 

pH2
(wie im Magen)

pH7.4
(wie Im Blut
)

pH 8.6
(wie im Experiment)

Albumin (IEP 4.7)

IgG (IEP 5.8)

Pepsin A (IEP 3.4)

Protein X (IEP 8)

Peptid von obiger Aufgabe (IEP10.2)

richtige Antwort